ГОСТ 12.4.136-84

Группа Т58

     
     
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
     

Система стандартов безопасности труда

СРЕДСТВА ИНДИВИДУАЛЬНОЙ ЗАЩИТЫ

Метод определения проницаемости микроорганизмами

System of safety standards. Personal protective means.
Method for determination of microorganism permeability

МКС 13.340
ОКСТУ 8509, 8309

Дата введения 1985-07-01

ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ

1. РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН Всесоюзным Центральным Советом Профессиональных Союзов

2. УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 23.03.84 г. N 896

3. ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ

4. Ограничение срока действия снятого по протоколу N 4-93 Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации (ИУС 4-94)

5. ИЗДАНИЕ (сентябрь 2003 г.) с Изменением N 1, утвержденным в сентябре 1989 г. (ИУС 1-90)


Настоящий стандарт распространяется на специальную одежду, средства защиты головы и рук и устанавливает метод определения проницаемости микроорганизмами швов соединения деталей, тканей и нетканых материалов.

Сущность метода заключается в сравнении количества выросших колоний микроорганизмов, проникших через испытываемую пробу, с количеством колоний микроорганизмов, выросших на контрольных пластинках.

Применение метода предусматривается при проектировании специальной одежды, средств защиты головы и рук, разработке новых тканей и материалов.

Стандарт не распространяется на каски защитные.

1. МЕТОД ОТБОРА ПРОБ

1. МЕТОД ОТБОРА ПРОБ

1.1. Отбор точечных проб проводят:

тканей - по ГОСТ 20566;

нетканых материалов - по ГОСТ 13587.

1.2. Длина точечной пробы должна быть (60±5) мм.

1.3. Для проведения испытаний из отобранных точечных проб тканей и материалов на расстоянии не менее 50 мм от кромки или края вырезают двенадцать элементарных проб размером 25х40 мм в продольном направлении.

1.4. Для проведения испытаний швов из двух элементарных проб тканей и материалов в продольном направлении изготовляют элементарную пробу шва в соответствии с требованиями ГОСТ 12.4.116.

Количество элементарных проб шва - двенадцать.

2. АППАРАТУРА, МАТЕРИАЛЫ И РЕАКТИВЫ

2.1. Для проведения испытаний применяют:

автоклав;

термостат по ГОСТ 20790;

прибор для счета колоний бактерий типа ПСБ;

чашки Петри по ГОСТ 23932;

шпатели по ГОСТ 19126;

пинцеты медицинские по ГОСТ 21241;

пипетки по ГОСТ 29227;

пробирки по ГОСТ 25336;

спиртовка по ГОСТ 23932;

питательная среда (мясо-пептонный агар или молочно-солевой агар, среда Эндо);

стеклянные пластинки из медицинского стекла по ГОСТ 19808 размером 25х40х2 мм;

стандарт мутности для оптической стандартизации бактерийных взвесей;

ТЕСТ-культура Staphylococus aurens индикаторный штамм 209 р или Escherichia coli индикаторный штамм 275;

фенол;

хлорамин;

физиологический раствор;

стерилизатор воздушный по ГОСТ 22649.

(Измененная редакция, Изм. N 1).

3. ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЮ

3.1. Элементарные пробы, уложенные в чашку Петри, питательную среду стерилизуют в автоклаве в течение 20 мин при температуре (120±2,0) °С, давлении (0,11±0,02) МПа.

3.2. Лабораторную посуду, инструменты, стеклянные пластинки подвергают стерилизации в воздушном стерилизаторе.

(Измененная редакция, Изм. N 1).

3.3. На тридцать стеклянных пластинок, помещенных по три в чашки Петри, разливают питательную среду по (3,5±0,5) см и равномерно распределяют по всей поверхности. Все манипуляции осуществляются в асептических условиях.

3.4. В соответствии с приложением рядом последовательных разведений готовят рабочий раствор тест-культуры.

4. ПРОВЕДЕНИЕ ИСПЫТАНИЙ

4.1. На восемнадцать стеклянных пластинок с питательной средой, из которых шесть являются контрольными, микропипеткой наносят тест-культуру по 0,2 см, равномерно шпателем распределяют ее по всей поверхности питательной среды и выдерживают в термостате в течение 15 мин при температуре (37±0,5) °С. Контрольные пластинки на 24 ч оставляют в термостате при температуре (37±0,5) °С.

4.2. На оставшиеся двенадцать стеклянных пластинок с питательной средой пинцетом раскладывают элементарные пробы лицевой стороной вверх. При этом питательная среда и элементарные пробы должны оставаться стерильными.

4.3. На элементарные пробы сверху накладывают стеклянные пластинки с питательной средой и тест-культурой (см. чертеж), чашки Петри закрывают и выдерживают в течение 30 мин в климатических условиях по ГОСТ 10681.

1 - чашка Петри; 2 - стеклянная пластинка; 3 - питательная среда с тест-культурой;
4 - элементарная проба; 5 - стерильная питательная среда

4.4. Через 30 мин из чашек Петри удаляют элементарные пробы вместе с пластинками с питательной средой и тест-культурой. Оставшиеся в чашках Петри пластинки с питательной средой помещают на 24 ч в термостат при температуре (37±0,5) °С для выращивания проникших через элементарные пробы микроорганизмов.

4.5. Через 24 ч с помощью прибора для счета колоний бактерий считают отдельно количество колоний микроорганизмов, выросших на шести контрольных пластинках и двенадцати пластинках с проникшими микроорганизмами.

При определении проницаемости микроорганизмами швов подсчет выросших колоний микроорганизмов проводят по линии строчки.

Если количество колоний микроорганизмов на контрольных пластинках не соответствует 200±30, проводят повторное испытание на вновь отобранных пробах.

5. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ

5.1. Проницаемость микроорганизмами () в процентах определяют по формуле

,

где - среднеарифметическая количества колоний микроорганизмов, выросших на двенадцати пластинках с проникшими микроорганизмами;

- среднеарифметическая количества колоний микроорганизмов, выросших на шести контрольных пластинках.

5.2. Вычисления проводят с точностью до 0,1%.

6. ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ

6.1. Требования безопасности - по ГОСТ 12.1.008.

6.2. По окончании испытаний элементарные пробы дезинфицируют в автоклаве в течение 45 мин при температуре (120±2,0) °С, давлении (0,11±0,02) МПа и уничтожают.

(Введен дополнительно, Изм. N 1).

ПРИЛОЖЕНИЕ (справочное). ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАБОЧЕГО РАСТВОРА ТЕСТ-КУЛЬТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЕ
Справочное

В пробирку с выращенной на агаре суточной тест-культурой наливают 2-3 см стерильного физиологического раствора и, вращая пробирку между ладонями, смывают выросшие колонии микроорганизмов. Затем 1 см смытого раствора тест-культуры переносят стерильной пипеткой в пробирку и разводят физиологическим раствором до соответствия по стандарту мутности для оптической стандартизации бактерийных взвесей 1 млрд микробных тел в 1 см.

В три пробирки разливают по 9,9 см физиологического раствора. В первую пробирку вносят 0,1 см приготовленного смытого раствора тест-культуры и тщательно перемешивают. Затем из первой пробирки во вторую, а из второй в третью переносят по 0,1 см тщательно перемешанного раствора.

В результате разведений в третьей пробирке находится основной рабочий раствор тест-культуры, который содержит 1000 микробных тел в 1 см.

Тест-культура должна обладать типичными культуральными свойствами, а также устойчивостью к действию химических факторов: выдерживать действие фенола (1:70) не менее 20-25 мин и 0,2%-ного раствора хлорамина не менее 10 мин. Устойчивость тест-культуры проверяется не реже одного раза в месяц.